VALIDATION D’UNE METHODE DE DOSAGE D’UN MELANGE DE MOLECULES A USAGE PHARMACEUTIQUE

Abstract

In our work, we undertook a study for the validation of a method of simultaneous determination by HPLC of Thiamine hydrochloride (vitamin B1) and pyridoxine hydrochloride (vitamin B6) active substances entering into the composition of Neurovit.

The method uses C18 reverse phase high pressure chromatography in isocratic mode. The mobile phase used is a water/triethylamine mixture adjusted to a pH of 2.7 with a 1N sulfuric acid solution. The detection was carried out using a UV/visible detector and the wavelength set at 280 nm. The operating conditions for separation and dosage were chosen after several tests carried out by varying the flow rate and the pH of the mobile phase.

The validation study on the chosen method showed that it is linear (R2 = 96%), that it is specific since the excipients do not interfere in the Neurovit assay and that it is exact (R2 = 90 %) and as the recovery rate obtained is satisfactory, the method is repeatable and reproducible, ------------------------------------------------------------------------------------------ قمنا بدراسة للتحقق من صحة طريقة التدقيق بواسطة كروماتوغرافيا السائلة عالية الجودة لهدروكلريد الثيامين ب1 وهيدروكلوريد البريدوكسين المكونين لدواء النوروفيت تستخدم كرومتوغرافيا عالية الضغط للطور العكسي C18 ,الناقل لمحرك عبارة عن مزيج من ماء مقطر وثلاثي إيثيل أمين بدرجة حموضة معدلة إلى 2,7 عن طريق حمض الكبريت 1ن تم إجراء الكشف بإستخدام كاشف UV/ VISIBLE عند طول موجة 280 نانومتر, تم إختيار التدفق والحموضة بعد عدة تجارب ----------------------------------------------------------------------------------------- Dans notre travail, nous avons entrepris une étude pour la validation d’une méthode de dosage simultanée par HPLC du chlorhydrate de Thiamine (vitamine B1) et du chlorhydrate de pyridoxine (vitamine B6) substances actives entrant dans la composition du Neurovit.

La méthode utilise une chromatographie à haute pression en phase inverse C18,, en mode isocratique. La phase mobile utilisée est un mélange eau/tri éthylamine ajusté à un pH de 2,7 par une solution d’acide sulfurique 1N. La détection a été effectuée grâce à un détecteur UV/visible et la longueur d’onde fixée à 280 nm. Les conditions opératoires de séparation et de dosage ont été choisies après plusieurs essais effectués en variant le débit et le pH de la phase mobile.

L’étude de la validation sur la méthode choisie a montré qu’elle est linéaire ( R2 = 96 % ), qu‘elle est spécifique puisque les excipients n’interfèrent dans le dosage du Neurovit et qu’elle est exacte (R2 = 90 % ). et comme le taux de recouvrement obtenu est satisfaisant la méthode est répétable et reproductible,