Isolement et Identification des Actinomycètes à partir du Mollusque Gastéropode Patella

Abstract

The present work aims to isolate, identify and study the antibacterial activity of actinomycete strains from a marine gastropod (Patella rustica Linnaeus 1758) collected from the beach El Safsaf - El Kala, wilaya of El Tarf.Ten strains, resembling actinomycetes in their macroscopic appearance, were isolated and purified. To study their morphological and physiological characteristics, these isolates were subjected to a set of tests on different ISP media in order to determine the cultural diversity and the different metabolic characters.According to the results obtained, all strains are Gram-positive bacteria, presenting a filamentous appearance characteristic of actinomycetes. Also, we could see that the majority of our isolates have cultural diversity over the range of ISP (International Streptomyces Project) environments which is assessed by the color of the aerial Mycelium, and the substrate Mycelium as well as the presence or absence of pigments soluble. Biochemical and physiological characterization showed that the strains use the majority of carbohydrates as a carbon source and have a broad enzymatic background. The majority of strains are mesophilic, halotolerant and neutrophilic. They can develop at pH ranging from 5 to 11 and temperature between 25°C and 37°C,they are anaerobic bacteria, incapable of synthesizing catalase and hydrolyzing casein, nor H₂S, use gelatin and reduce nitrate, assimilates citrate and neither produces melanoid pigments on ISP6 and ISP7 media.In this study we tested the antibacterial activity of actinomycetes. It was evaluated by the disc technique against four bacteria: Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa,Listeria monocytogenes and Staphylococcus aureus.The antibacterial activity after extraction with ethyl acetate revealed that the strains had significant activity against Listeria monocytogenes ATCC19115 and moderate activity against Escherichia coli ATCC 10536. ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- يهدف العمل الحالي إلى عزل وتحديد ودراسة النشاط المضاد للبكتيريا لسلالات الشعيات من بطني الأقدام البحرية (الرضفة روستيكالينيوس 1758) التي تم جمعها من شاطئ الصفصاف - القالة، ولاية الطارف. تم عزل وتنقية عشر سلالات تشبه الشعيات في مظهرها العياني. لدراسة صفاتها المورفولوجية والفسيولوجية، تم إخضاع هذه العزلات لمجموعة من الاختبارات على أوساط مختلفة من ISP لتحديد التنوع والصفات الأيضية المختلفة. وفقا للنتائج التي تم الحصول عليها، والمراقبة المجهرية جميع السلالات هي بكتيريا إيجابية الجرام، وتقديم مظهر خيطي مميز للشعيات. أيضًا، يمكننا أن نرى أن غالبية العزلات لدينا لديها تنوع عبر نطاق بيئات ISP (المشروع الدولي للستربتوميسيس) والذي يتم تقييمه من خلال لون الميسليوم الجوي، والأفطورة الركيزة بالإضافة إلى وجود أو عدم وجود أصباغ. قابل للذوبان. أظهر التوصيف الكيميائي الحيوي والفسيولوجي أن السلالات تستخدم غالبية الكربوهيدرات كمصدر للكربون ولها خلفية إنزيمية واسعة. غالبية السلالات محبة للحمض، ومتسامحة مع الهالوت، ومحبة للعدلات، ويمكن أن تتطور عند درجة حموضة تتراوح من 5 إلى 11 ودرجة حرارة تتراوح بين 25 و 37 درجة مئوية وهو أمر نادر بالنسبة لجميع البكتيريا.، هي بكتيريا لا هوائية، غير قادرة على تصنيع الكاتالازوالكازين المائي، ولا H₂S، تستخدم الجيلاتين وتقلل النترات، وتستوعب السترات ولا تنتج أصباغ الميلانويد على وسائط ISP6 وISP7. في هذه الدراسة قمنا باختبار النشاط المضاد للبكتيريا للفطريات الشعوية. تم تقييمها بتقنية القرص ضد أربع بكتيريا هي: الإشريكية القولونية، الزائفة الزنجارية، الليستيريا المستوحدة والمكورات العنقودية الذهبية.ظهر النشاط المضاد للبكتيريا بعد الاستخلاص باستخدام أسيتاتالإيثيل أن السلالات كان لها نشاط معنوي ضد Listeria monocytogenes ATCC19115 ونشاط معتدل ضد Escherichia coli ATCC 10536. ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- Le présent travail a pour objectif l’isolement, l'identification et l'étude de l'activité antibactérienne des souches d'actinomycètes à partir d'un gastéropode marin (Patella rusticaLinnaeus1758) prélevé à partir de la plage El Safsaf - El Kala, wilaya d’El Tarf. Dix souches se rapprochant par leur aspect macroscopique aux actinomycètes, ont été isolées et purifiées. Pour l'étude de leurs caractéristiques morphologique et physiologique, ces isolats ont été soumis à un ensemble de tests sur différents milieux ISP afin de déterminer la diversité culturale et les différents caractères métaboliques.D'après les résultats obtenus, toutes les souches sont des bactéries Gram positif, présentant un aspect filamenteux caractéristique des actinomycètes. Aussi, on a pu constater que la majorité de nos isolats ont une diversité culturale sur la gamme des milieux ISP (International Streptomyces Project) qui est appréciée par la couleur du Mycélium aérien, et du Mycélium de substratainsi que la présence ou pas des pigments solubles.La caractérisation biochimique et physiologique a montré que les souches utilisent la majorité des glucides comme source de carbone et possède un large bagage enzymatique. La majorité des souches sont des mésophiles, halotolérantes et neutrophiles pouvant se développer à pH allant de 5 à 11 et une température entre 25 °C et 37 °C, ce sont des bactéries anaérobies incapables de synthétiser la catalase et d’hydrolyser la caséine, ni H₂S, en utilisent la gélatine et réduisent le nitrate, assimilent le citrate et ne produisent pas des pigments mélanoïdes sur les milieux ISP6 et ISP7.Dans cette étude nous avons testé l'activité antibactérienne des actinomycètes. Elle a été évaluée par la technique des disques vis- à- vis de quatre bactéries : Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Listeria monocytogenes et Staphylococcus aureus.A l’extraction par l’éthyle acétate, l’activité antibactérienne a révélé que les souches ont une activité importante vis-à-vis Listeria monocytogenes ATCC19115 et modérée vis-à-vis Escherichia coli ATCC 10536.