ESSAI DE PURIFICATION ET CARACTÉRISATION BIOCHIMIQUE DES ENZYMES XYLANOLYTIQUE D’UNE SOUCHE D’ACTINOMYCÈTES TELLURIQUE S215 ISOLÉE DE LA REGION DE TAOURA SOUK-AHRAS.

Abstract

In the framework of the search for xylanolytic enzymes in telluricmicroorganisms, an actinomycetestrain S215, isolatedfrom the agricultural telluric medium of the Taouraregion-Souk Ahras- wasused. The strainisgrown in liquidwheat-basedHorikoshi bran as the only source of carbonthatallows us to isolatexylanases. Enzyme activity has been estimated at 228.29 IU / ml. Subsequently, weproceeded to optimize the culture and pH time of strain S215 on a liquid medium of Horikoshibased on wheat bran. Purification of these enzymes wasperformed by the acetonefractionationmethod to characterizethem. The partiallypurified enzyme givestwo fractions (20% and 80% concentration of acetone). The biochemicalstudy shows thatxylanase has a betteractivityat pH 9 and at 50° C.Thesevariousresultsobtainedwouldbe favorable to the use of this enzyme in the agri-foodsector and the paperindustry. ----------------------------------------------------------------------------------------- في سياق البحث عن الإنزيماتالغزيلانوليتيكية عند الكائنات الحية الدقيقة التحليلية،تم عزل سلالة Actinomycéte S215 من الوسط التحليلي الزراعي لمنطقة تاورة - سوق اهراس - السلالة Actinomycéte S215 زرعت في الوسط السائلHorikoshiالذي يحتوي على نخالة القمح كمصدر وحيد للكربون ، حيث اظهرت ان لديها نشاطغزيلانوليتيكي من أجل 264.53 وحدة دولية/مل. في وقت لاحق ، شرعنا في تحسين شروط الزراعة (زمن و درجة الحموضة)للسلالة S215في الوسط السائل، فأظهرت النتائج التي تم الحصول عليها أنه يتم الوصول إلى النشاط الغزيلانوليتيكي الامثل بعد وقت زراعة 48 ساعة و في وسط قلوي ذو درجة الحموضة 7.5 . يظل هذا النشاط منافسًا مقارنةً بالنشاط الذي تم الحصول عليه في جنس Bacillus و Streptomyces. في جزء آخر من العمل ، حاولنا تنقية الغزيلانازالمطلوب وتحديد خصائصه البيو كيميائية. وبالتالي ، من خلال تقنية التنقية بالتجزئة بالأسيتونينقى الغزيلاناز جزئياً ويعطي نوعين من الغزيلاناز في درجتين مختلفتين منتركيز الاسيتون و هما 20٪ و 80٪ مع نشاط من 659.1 وحدة دولية / مل و 953.8 وحدة دولية / مل على التوالي. تبين الدراسة البيو كيميائية أن الغزيلاناز له نشاط أفضل عنددرجة الحموضة9 و عند درجة حرارة 50 درجة مئوية. هذه النتائج المختلفة التي تم الحصول عليها ستكون مواتية لاستخدام هذا الإنزيم في قطاع الأغذية الزراعية وصناعة الورق. -------------------------------------------------------------------------------------------- Dans le cadre de la recherche des enzymes xylanolytiques chez les microorganismes telluriques, une souche d’Actinomycète S215 est isolée à partir du milieu tellurique agricole de la région de Taoura -Souk Ahras-. La souche d’Actinomycéte S215 est cultivée dans le milieu Horikoshi liquide à base de son de blé comme seule source de carbone, présente une activité xylanolytique de l’ordre de 264.53 UI/ml. Par la suite, nous avons procédé à l’optimisation du temps de culture et de pH de la souche S215 sur milieu liquide, les résultats obtenues montrentque l’optimum d’activité xylanolytique est atteint au bout d’un temps de culture de 48h, dans un milieu alcalin de pH 7.5. Cette activité reste compétitive par rapport à celles obtenues chez le genre Bacillus et Streptomyces. Dans une autre partie du travail, nous avons tenté de purifier la xylanase recherchée et déterminé ses propriétés biochimiques. Ainsi, par technique de fractionnement par l’acétone la xylanaseest partiellement purifiée et donne deux fractions à 20% et 80% de concentration de l’acétone avec un activité de l’ordre de 659,1 UI/ml et 953,8 UI/ml respectivement. L’étude biochimique montre que la xylanase possède une meilleure activité à pH 9 et à température de 50°C. Ces différents résultats obtenus seraient favorables à l’utilisation de cette enzyme dans le secteur agro-alimentaire et l’industrie du papier.