Etude des effets biologiques de la propolis de la région de Souk Ahras
Date
2024
Authors
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Abstract
Propolis is a sticky substance that foraging Apismellifera bees get from the buds and resins of some plants. Its biochemical composition changes depending on the plant it comes from. Bees use it to construct and mold the hive. Because of its complex composition and wide range of associated activities, researchers continue to investigate propolis properties. The aim of this study is to enhance the value of propolis through a quantitative and qualitative analysis of its composition and by using in vitro methods to evaluate the biological effects of two samples of propolis collected from the regions (Lakhdara and Bendeda), located in the province of Souk Ahras in eastern Algeria. We carried out the extraction using a simple maceration method in a solution of 70% ethanol and 70% acetone (Solvent/Water; 70/30; v/v), resulting in four distinct extracts EEP1, EAP1, EEP2, and EAP2. The extraction yield varies from 18.32% to 34.54%, indicating that it is dependent on both the extraction solvents and the geographical origin of the propolis. The quantitative analysis showed that these extracts were very high in phenolic compounds. The concentrations of total polyphenols reached 211.06 μg GAE/mg, flavonoids reached 91.18 μg EQ/mg, and condensed tannins reached 83.87 μg TAE/mg. We used chromatographic techniques (GC/MS and HPLC/MS) to characterize and identify these compounds. The results showed that they contained terpenes, cinnamic acids, phenols, and flavonoids like caffeic acid, rutin, quercetin, chrysin, and catechin. Additionally, we observed that all extracts exhibited significant antioxidant activity, as evidenced by a strong radical scavenging effect for DPPH, ABTS, and GOR, as well as a high reduction capacity in the presence of copper and iron ions (CUPRAC, PR, and phenolthroline methods). The CI50 values (DPPH = 3.49 μg/ml, ABTS = 3.11 μg/ml, GOR = 16.08 μg/ml) and A0.5 values (CUPRAC = 4.63 μg/ml, PR = 7.43 μg/ml, Phen = 10.25 μg/ml) were noteworthy for the most active extract. The EEP2 and EAP2 extracts possess an inhibitory potential of the actylcholinesterase enzyme with CI50s of 10.00 and 11.38µg/ml, respectively. Using the method of thermal denaturation of bovine serum albumin (BSA), the study of propolis'sin vitro anti-inflammatory activity demonstrated the ability of all extracts to inhibit protein denaturation. The observed inhibition rates range from 91.01% to 97.04%, compared to the standard sodium diclofenac, which has an inhibition rate of 98.09%. Furthermore, the crude propolis extracts showed antimicrobial activity against the bacterial strains Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphlococcusaureus, Bacillus cereus, and Candida albicans. The EEP1 and EAP1 extracts had an interesting effect on the Gram-positive strain Bacillus cereus. They had inhibition zones of 15 mm and 13 mm, and the minimum inhibitory concentration (MIC) was 6.25 mg/ml for EEP1 and 12.5 mg/ml for EAP1. On the other hand, the effect is less significant on the Gram-negative bacterium Escherichia coli (9 mm, MIC = 50 mg/ml). The rest of the bacteria showed some resistance. The propolis extracts showed strong inhibitory activity against the phytopathogenic fungi that were tested, highlighting their antifungal properties. The ethanolic extract (EEP2) was the most effective, showing inhibition rates of up to 73% against Fusariumoxysporum f. s. lycopersici and 69% against Botrytis cinerea.
Description
La propolis, un produit résineux récolté par les abeilles butineuses de l’espèce Apis mellifera à partir des bourgeons et des résines de certaines plantes, procède une composition biochimique qui varie en fonction de son origine botanique. Elle utilisée pour construire et conditionner la ruche. Les chercheurs poursuivent l'exploration propriétés de la propolis en raison de sa composition complexe et de son large éventail d'activités associées. L'objectif de cette étude est de valoriser la propolis par l’étude quantitative /qualitative de sa composition, ainsi qu'en évaluant les effets biologiques de deux échantillons de propolis récolté dans les régions (Lakhdara et Bendeda) situées dans la province de Souk Ahras situé à l’est Algérien, à l’aide de méthodes réalisées in vitro. L’extraction est effectuée par une méthode de macération simple dans une solution d'éthanol à 70% et l’acétone 70% (Solvant/ Eau ; 70/30 ; v/v) ce qui permet d'obtenir quatre extraits différents EEP1, EAP1, EEP2 et EAP2. Le rendement d’extraction varie de 18.32% à 34.54%, ce qui indique sa dépendance à la fois des solvants d'extraction et de l'origine géographique de la propolis. En ce concerne l’analyse quantitative a révélé la richesse de ces extraits en composés phénoliques, avec des concentrations mesurées atteignant 211.06 µg GAE/mg pour polyphénols totaux, 91,18 μg EQ/mg pour flavonoïdes et 83,87 μg TAE/mg pour les tanins condensés. La caractérisation et l’identification de ces composés sont réalisé par les méthodes chromatographiques GC/MS et HPLC/MS, qui ont montré la présence des terpènes, acides cinnamiques, des phénols, des flavonoïdes incluant l'acide caféique, la rutine, la quercétine, la chrysine, la catéchine… etc. De plus, il a été observé que tous les extraits présentaient une activité antioxydante significative, se manifestant par un fort effet de piégeage des radicaux DPPH, ABTS et GOR, et par une grande capacité de réduction en présence d'ions cuivre et fer (méthodes CUPRAC, PR, Phénanthroline). Les valeurs d’CI50 (DPPH = 3.49 μg/ml, ABTS = 3.11 μg/ml, GOR = 16.08 μg/ml) et les valeurs A0.5 (CUPRAC = 4.63 μg/ml, PR =7.43 μg/ml, Phen = 10.25 μg/ml) ont été particulièrement notables pour l'extrait le plus actif. Les extraits EEP2 et EAP2 possèdent un potentiel inhibiteur de l’enzyme acétylcholinestérase avec des CI50 de 10.00 et 11.38 µg/ml respectivement. L'étude de l'activité anti-inflammatoire in vitro de propolis,réalisée en utilisant la méthode de dénaturation thermique du sérum albumine bovine (BSA), a démontré que tous les extraits sont capable d’inhibé la dénaturation protéique. Les taux d'inhibition observés varient de 91.01% à 97.04% par rapport au standard diclofénac sodique qui affiche un taux d'inhibition de 98.09%. Outre, l’activité antimicrobienne des extraits bruts de la propolis a été testé vis à vis les souches bactériennes Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphlococcus aureus, Bacillus cereus, Candida albicans. Les extraits EEP1 et EAP1 ont démontré un effet intéressant contre la souche Gram positif Bacillus cereus, se traduisant par des zones d'inhibition de 15 mm et 13 mm respectivement, ainsi qu'une concentration minimale inhibitrice (CMI) de 6.25 et 12.5 mg/ml. Par contre, l'effet est moins important sur la bactérie à Gram négatif Escherichia coli (9 mm, CMI = 50 mg/ml). Le reste des bactéries ont présenté une certaine résistance. L'activité antifongique des extraits de propolis a été mise en évidence, montrant une activité inhibitrice significative envers les champignons phytopathogènes testés. L'extrait éthanolique (EEP2) se révèle le plus efficace, affichant des taux d'inhibition allant jusqu'à 73% contre Fusariumoxysporum f. splycopersici et 69% contre Botrytis cinerea.
Keywords
propolis, eastern Algeria, chromatography, biological activities, البروبوليس، الشرق الجزائري، كروماتوغرافيا، أنشطة بيولوجية, est algérien, chromatographie, activités biologiques