Isolement et identification moléculaire des actinomycètes productrices de substances antimicrobiennes à partir des Scarabées collectés dans la région de Souk-Ahras.

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The objective of this study which is part of the field of microbiology is the search of actinomycetes capable of synthesizing antibacterial substances in unexplored habitats. For this, 25 isolates were obtained from scarab beetles, Protaetia morio (Fabricius, 1781) and Aethina tumida (Murray, 1867) collected in 2021 in the Souk-Ahras region. Their morphological, cultural, biochemical and physiological characteristics bring them closer to actinomycetes. Analyses of the nucleotide sequences of the 16S rRNA genes made it possible to assign the CF51DZ strain to Streptomyces mediolani and the CR4DZ strain to Streptomyces avermitilis. The antibacterial activity by well diffusion of actinomycete strains CF25, CF45, CF51, CF4, CF16 showed high activity against pathogenic bacteria Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa. The bioactive compound of CF51DZ was extracted, purified and characterized using various techniques such as thin layer chromatography (TLC), high performance liquid chromatography (HPLC), ). The molecular identification test showed an identity of 97.47% compared to the sequences of the Streptomyces mediolani strains for the CF51DZ strain and 98.61% for the CR4DZ strain compared to Streptomyces avermitilis The mass spectrometry (MS) and nuclear magnetic resonance spectroscopy (NMR). Its structure was determined as methyl rosarinate, with a molecular formula C19H18O8. The results of this study could have great importance for research on Actinomycetes and for understanding their role in insects which may be a protective role against pathogenic microorganisms.

Description

L’objectif de ce travail qui s’inscrit dans le domaine de microbiologie est la recherche des actinomycètes capables de synthétiser des substances antibactériennes dans des habitats peu explorés. Pour cela, 25 isolats ont été obtenus à partir des coléoptères scarabées, Protaetia morio (Fabricius, 1781) et Aethina tumida (Murray, 1867) collectés en 2021 dans la région de Souk-Ahras. Leurs caractéristiques morphologiques, culturales, biochimiques et physiologiques les rapprochent aux actinomycètes. Les analyses des séquences nucléotidiquesdes gènes ARNr 16S, ont permis d’affecter la souche CF51DZ auStreptomyces mediolani et la souche CR4DZ au Streptomyces avermitilis. L’activité antibactériennepar diffusion sur puits des souches d'actinomycètes CF25, CF45, CF51, CF4, CF16 ont montré une forte activité contre des bactéries pathogènes Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli et Pseudomonas aeruginosa. Le composé bioactif de CF51DZ a été extrait, purifié et caractérisé à l’aide de diverses techniques telles que la chromatographie sur couche mince (CCM), la chromatographie liquide à haute performance (CLHP), la spectrométrie de masse (SM) et la spectroscopie de résonance magnétique nucléaire (RMN). Sa structure a été déterminée comme étant le rosarinate de méthyle, avec une formule moléculaire C19H18O8. Les résultats de cette étude pourraient avoir une grande importance pour la recherche sur les Actinomycètes et pour la compréhension de leur rôle chez les insectes, qui pourrait être un rôle protecteur contre les micro-organismes pathogènes.

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